陰離子色譜柱是一款氫氧根陰離子交換色譜柱，能快速梯度分離各種樣品中常見無機(jī)陰離子，該柱子關(guān)鍵的應(yīng)用是檢測(cè)高純水中常見無機(jī)陰離子。該色譜柱具有較低的硫酸根空白，基線能快速平衡來分析痕量的陰離子。
陰離子色譜柱洗脫：
1、洗脫液的選擇：
（1）保證所有組分在洗脫液梯度范圍內(nèi)都是穩(wěn)定的。
（2）要使結(jié)合在離子交換劑上的所有組分在洗脫液梯度范圍內(nèi)都能夠被洗脫。
（3）梯度范圍盡量小一些，以提高分辨率。
2、洗脫方式：離子交換色譜一般采用梯度洗脫，通常有改變離子強(qiáng)度和改變pH值兩種洗脫方式。
（1）改變離子強(qiáng)度的洗脫：在洗脫過程中逐步增大離子強(qiáng)度，從而使與離子交換劑結(jié)合的各個(gè)組分被洗脫下來。
（2）改變pH值的洗脫：陽離子交換劑一般是pH值從低到高洗脫，陰離子交換劑一般是pH值從高到低洗脫。由于pH值可能對(duì)蛋白的穩(wěn)定性有較大的影響，一般采用改變離子強(qiáng)度進(jìn)行洗脫。
3、洗脫速度：洗脫液的流速會(huì)影響離子交換分離效果，洗脫速度通常要保持恒定。一般來說，洗脫速度慢比快的分辨率要好，但過慢會(huì)造成分離時(shí)間長、樣品擴(kuò)散、譜峰變寬和分辨率降低等。
如果洗脫峰相對(duì)集中于某個(gè)區(qū)域造成重疊，應(yīng)適當(dāng)縮小梯度范圍或降低洗脫速度來提高分辨率。如果分辨率較好，但洗脫峰過寬，可適當(dāng)提高洗脫速度。
陰離子色譜柱保留特性的變化規(guī)律及應(yīng)對(duì)措施
在離子交換色譜中,存在著3種電離平衡,分別是樣品組分的電離平衡、流動(dòng)相中緩沖溶液的電離平衡、柱上離子交換基團(tuán)的電離平衡。
陰離子色譜柱保留行為的變化、流動(dòng)相組成的調(diào)整,會(huì)綜合影響到上述的電離平衡,這種影響較為復(fù)雜,并不是一致的。如提高流動(dòng)相的pH值,會(huì)促進(jìn)流動(dòng)相的電離,增加流動(dòng)相的洗脫強(qiáng)度,減小樣品組分的保留;pH值的增加同時(shí)又會(huì)促進(jìn)樣品的電離,增加樣品組分的保留,同時(shí)還會(huì)抑制陰離子色譜柱上硅烷銨鹽的電離,減小樣品組分的保留。
