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適用范圍
適用于以蘋果為原料的飲料（本實(shí)驗(yàn)采用酷兒的蘋果味飲料）。
參考標(biāo)準(zhǔn)：《GB 5009.185-2016 食品安全國家標(biāo)準(zhǔn) 食品中展青霉素的測(cè)定》。
SPE凈化步驟
SPE柱：月旭Welchrom®BRP規(guī)格：150mg/6mL。
活化：6mL甲醇、6mL水，棄去；
上樣：待凈化液全部上樣，控制流速，不宜過快，棄去；
淋洗：用3mL乙酸銨溶液淋洗，再用3mL水淋洗，棄去并抽干小柱；
洗脫：用8mL甲醇洗脫，收集于15mL離心管中；
加入20μL乙酸，混勻，40℃水浴氮吹至近干，用乙酸水溶液定容至1mL，過0.22μm有機(jī)濾膜，待檢測(cè)。
色譜條件
色譜柱：月旭Ultimate®XB-C18，4.6*250mm，5μm。
流動(dòng)相：水-乙腈---梯度見下表；
流速：1.2mL/min；
柱溫：30℃；
進(jìn)樣量：20μL；
檢測(cè)波長：276nm。
液相色譜梯度洗脫條件
時(shí)間 | 水 | 乙腈 |
0 | 90 | 10 |
15 | 90 | 10 |
15.01 | 0 | 100 |
20 | 0 | 100 |
20.01 | 90 | 10 |
25 | 90 | 10 |
色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果
圖1.展青霉素50ng/mL圖譜
圖2.樣過柱圖譜
圖3.0.025mg/kg 樣加標(biāo)圖譜
展青霉素過BRP小柱加標(biāo)回收表
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