動物組織中yan酸克倫特羅的測定

一、適用范圍

本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了測定動物組織中yan酸克倫特羅的氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）（本實(shí)驗(yàn)樣品為雞肝）。

參考標(biāo)準(zhǔn)《NY/T 468-2006 動物組織中yan酸克倫特羅的測定 氣相色譜-質(zhì)譜法》

二、提取步驟

準(zhǔn)確稱取5g試樣（j確至0.01g）于50 mL離心管中，加入15mL乙酸乙酯，再加入3mL 10%碳酸鈉溶液，加入勻質(zhì)子渦旋混勻2min，以5000r/min離心3min，吸取上層有機(jī)溶劑于50 mL離心管中，在殘?jiān)性俅渭尤?0mL乙酸乙酯渦旋混勻1min，以5000r/min離心3min，吸取有機(jī)溶劑合并提取液。在提取液中加入5mL 0.1mol/L的鹽酸溶液，渦旋混勻30s, 以5000r/min離心3min，吸取下層萃取液，重復(fù)同樣步驟萃取一次，合并兩次萃取液，用2.5mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至5.2（±0.2）。

三、凈化步驟

SPE柱：月旭Welchrom® P-SCX小柱，規(guī)格：500mg/6mL;

活化：5mL甲醇，5mL水，5mL 30mmol/L鹽酸；

上樣：將萃取液全部上樣，棄去；

淋洗：5mL水，5mL甲醇，棄去并壓干；

洗脫：5mL 4%氨水甲醇，收集并壓干。

四、衍生

將洗脫液于50℃下氮吹至干，在衍生瓶中加入甲苯100μL，雙*基硅烷三fu乙酸胺（BSTFA）100μL，充分渦旋混勻后，置80℃烘箱中，反應(yīng)1h。冷卻至室溫后加入300μL甲苯，混勻，轉(zhuǎn)入進(jìn)樣小瓶，上機(jī)測定。

五、色譜條件

- 氣相色譜條件

色譜柱：WM-5MS, 30m×0.25mm×0.25μm；

進(jìn)樣口溫度：220℃；

升溫程序：70℃，保持0.6min，以25℃/min升溫至200℃，保持6min，以25℃/min升溫至280℃，保持5min；

載氣：高純氦氣（純度>99.999%）；

進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣；

恒流模式：0.9mL/min；

進(jìn)樣量：1μL。

- 質(zhì)譜條件

電離方式：電子轟擊電離源（EI）；

電離能量：70eV；

傳輸線溫度：280℃；

離子源溫度：230℃；

四極桿溫度：150℃；

監(jiān)測方式：克倫特羅：86/212/262/277；

溶劑延遲：8min；

六、色譜圖或者加標(biāo)回收率結(jié)果