中藥成分液相分析常見(jiàn)問(wèn)題——前沿峰

1. 柱過(guò)載

每一根色譜柱都有其最大樣品承載量，當(dāng)樣品量過(guò)多時(shí)會(huì)出現(xiàn)超載現(xiàn)象，包括質(zhì)量過(guò)載和體積過(guò)載。

2.色譜柱損壞

色譜柱在長(zhǎng)時(shí)間使用之后就會(huì)導(dǎo)致硅膠填料的溶解，柱床崩解，從而柱效降低導(dǎo)致峰前沿。

3.峰干擾

兩個(gè)化合物共洗脫，即在大峰前有小峰出現(xiàn)，色譜峰沒(méi)有分開(kāi)。

4.樣品溶劑的影響

當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力大大強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰。

具體就是說(shuō)，樣品在色譜柱中均勻的往前移，我們通常會(huì)得到呈正態(tài)分布的的峰。當(dāng)樣品溶液進(jìn)樣后到達(dá)色譜柱的時(shí)間比較短，在未被流動(dòng)相充分稀釋時(shí)，由于洗脫能力比較強(qiáng)的樣品溶劑存在，使部分樣品被洗脫的速度加快，快速通過(guò)色譜柱，最終導(dǎo)致峰前延。

中藥成分分析項(xiàng)目中，提取溶劑通常為乙醇、甲醇、乙酸乙酯等洗脫強(qiáng)度較強(qiáng)的溶劑，此時(shí)易發(fā)生“樣品溶劑的洗脫強(qiáng)度遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)流動(dòng)相"的情況，為避免前延峰出現(xiàn)，可以用通過(guò)“流動(dòng)相稀釋提取液"或降低“進(jìn)樣體積"的方式。

色譜條件：

色譜柱：Ultimate^® AKL-C18（4.6×250mm，5μm）。

流速：1.0mL/min；

流動(dòng)相：甲醇：水=1：1.1；

檢測(cè)波長(zhǎng)：280nm；

柱溫：30℃；

進(jìn)樣體積：10μL。

色譜圖：

(1) 標(biāo)準(zhǔn)品

(1) 標(biāo)準(zhǔn)品